בימי השלטון הסובייטי היו רבים מיהודי טירספול בעלי מלאכה, וקצתם התארגנו בקואופרטיבים. בעיר פעלו שני בתי ספר שהתנהלו ביידיש, אחד מהם מקצועי. בין שתי מלחמות העולם עברו לטירספול יהודים מכפרי ועיירות הסביבה, והיישוב היהודי בה גדל. ערב פלישת גרמניה לברית-המועצות נמנו בעיר כ-12,000 יהודים – רבע מכלל התושבים בה.
טירספול נכבשה בדי הגרמנים והרומנים ב-8 באוגוסט 1941. מספר לא ידוע של יהודים הצליחו להתפנות או להימלט מזרחה לפני הכיבוש. את רוב היהודים שנשארו בעיר רצחו הגרמנים כבר בימי הכיבוש הראשונים. רק מעטים הצליחו לשרוד, בעזרתם של נוצרים שהסתירו אותם.
ב-1 בספטמבר 1941, לאחר שסופחה לטרנסניסטריה, עברה טירספול לשלטון רומניה. כמה עשרות צעירות יהודיות שניצלו מהרצח ההמוני נאנסו ונרצחו לאחר מכן בידי אנשי מינהל וקצינים רומנים. מספטמבר 1941 הייתה העיר לתחנת מעבר מרכזית של אלפי מגורשים יהודים מרומניה לטרנסניסטריה, וכמה מהם הצליחו להישאר בעיר.
בקיץ 1942 חיו בטירספול כ-100 יהודים, 40-30 מהם בעלי מלאכה. יהודים אלו רוכזו בבניין בית החולים של העיר, שהפך לגטו. במהלך 1943 הצליחו להגיע לעיר יהודים נוספים, ומספר תושבי הגטו גדל בהדרגה לכ-800. הבניין והגן שמסביבו גודרו בתיל דוקרני.
השלטונות הרומניים הקימו בגטו שתי מתפרות, סנדלרייה, בית חרושת זעיר לייצור סבון ומספרה. גטו טירספול הפך למופת של עזרה עצמית וארגון פנימי, בין היתר בזכות היחס הטוב של יקובסקו (Iacobescu), מפקד הז'נדרמריה הרומנית במקום. יהודים שהועסקו בבתי המלאכה ובשירותים שונים בגטו הפרישו מחצית משכרם לקופה משותפת, ובכספים הוקם בגטו בית תמחוי ששירת את כל תושביו וגם מאות יהודים ששהו בטירספול בדרכם למקומות אחרים בטרנסניסטריה. בגטו פעלו גם מרפאה ובה שש עד שמונה מיטות ומרפאת שיניים. את הגן שמסביב לבניין ניצלו תושבי הגטו לגידול תוצרת חקלאית למזונם. בזכות רמת ההיגיינה הטובה שנשמרה בגטו לא התפשטה בו מגפת הטיפוס, אף-על-פי שכמה מיושבי הגטו חלו בה בתחילת שהותם של היהודים במקום.
בשל התנאים הסבירים יחסית ששררו בו היה גטו טירספול למקום מקלט למגורשי טרנסניסטריה שהצליחו להגיע אליו. תושבי הגטו הקימו חדר תפילה, הם אף השיגו ספר תורה ושופר מאחד מכפרים הסמוכים, ובחגי היהודים הותר להם לשבות מעבודתם. היהודים גם ארגנו מסיבות והופעות. בדצמבר 1943 קיבלו תושבי הגטו סיוע מוועד העזרה בבוקרשט. ועד העזרה גם ניסה לארגן את החזרתם של מגורשי מחוז דורוהוי (Dorohoi) לרומניה.
עם התקרבות החזית קיבלו תושבי הגטו מהז'נדרמים הרומנים רישיונות לשוב לבתיהם, ובין 17 ל-19 במרס 1944 הם צלחו את הדנייסטר, עם עוד מגורשים מיישובים אחרים בדרום טרנסניסטריה. עם עזיבת הרומנים השתלטו הגרמנים על העיר והוציאו להורג אסירים רבים שנכלאו בבית הכלא המקומי, קצתם יהודים.
הסובייטים שחררו את טירספול ב-12 אפריל 1944.
